无菌技术的概念和原则_无菌技术操作原则及注意事项
1、环境要清洁,进行无菌操作前半小时,须停止清扫地面等工作。
2、避免不必要的人群流动,防止尘埃飞扬。
(相关资料图)
3、治疗室应每天用紫外线消毒一次。
4、2、在执行无菌操作时,必须明确物品的无菌区和非无菌区。
5、3、执行无菌操作前,先戴帽子、口罩、洗手,并将手擦干,注意空气和环境清洁。
6、4、夹取无菌物品,必须使用无菌持物钳。
7、 四、进行无菌操作时,凡未经消毒的手、臂、均不可直接接触无菌物品或超过无菌区取物。
8、5、无菌物品必须保存在无菌包或灭菌容器内,不可暴露在空气中过久。
9、无菌物与非无菌物应分别放置。
10、无菌包一经打开即不能视为绝对无菌,应尽早使用。
11、凡已取出的无菌物品虽未使用也不可再放回无菌容器内。
12、6、无菌包应按消毒日期顺序放置在固定的柜橱内,并保持清洁干燥,与非灭菌包分开放置,并经常检查无菌包或容器是否过期,其中用物是否适量。
13、7、无菌盐水及酒精、新洁尔灭棉球罐每周消毒一次,容器内敷料如干棉球、纱布块等,不可装得过满,以免取用时碰在容器外面被污染。
14、 玻璃器皿的消毒和清洁⑴新购玻璃器皿的处理新购玻璃器皿应用热肥皂水洗刷,流水冲洗,再用1%~2%盐酸溶液浸泡,以除去游离碱,再用水冲洗。
15、对容量较大的器皿如试剂瓶、烧瓶或量具等,经清水洗净后应注入浓盐酸少许,慢慢转动,使盐酸布满容器内壁数分钟后倾出盐酸,再用水冲洗。
16、⑵污染玻璃器皿的处理①一般试管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%石炭酸浸泡,再煮沸30分钟,或在3%~5%漂白粉澄清液内4小时,有的亦可用肥皂或合成洗涤剂洗刷使尽量产生泡沫,然后用清水冲洗至无肥皂为止。
17、最后用少量蒸馏水冲洗。
18、②细菌培养用的试管和培养皿可先行集中,用1kg/cm2高压灭菌15~30分钟,再用热水洗涤后,用肥皂洗刷,流水冲洗。
19、③吸管使用后应集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小时,逐支用流水反复冲洗,再用蒸馏水冲洗。
20、④油蜡沾污的器皿,应单独灭菌洗涤,先将沾有油污的物质弃去,倒置于吸水纸上,100℃烘干半小时,再用碱水煮沸,肥皂洗涤,流水冲洗。
21、必要时可用二甲苯或汽油去油污。
22、⑤染料沾污的器皿,可先用水冲洗,后用清洁或稀盐酸洗脱染料,再用清水冲洗。
23、一般染色剂呈碱性,所以不宜用肥皂的碱水洗涤。
24、⑥玻片可置于3%煤酚皂溶液中浸泡,取出后流水冲洗,再用肥皂或弱碱性煮沸,自然冷却后,流水冲洗。
25、被结核杆菌污染或不易洗净的玻片,可置于清洁液内浸泡后再冲洗。
26、2、无菌器材和液体的准备将玻璃器具中的培养皿、培养瓶、试管、吸管等按上述方法洗净烘干后,用一洁净纸包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花,装入干净的铝盒或铁盒中,于120℃的干燥箱中干燥灭菌2小时,取出备用。
27、对于手术器械、瓶塞、工作服以及新配制的PBS洗液,则采用高压蒸气灭菌法,即在15磅的条件下,加热20分钟。
28、而对于MEM培养液、小牛血清和消化液等需用G5或G6滤器负压抽滤后使用。
29、3、无菌操作过程在无菌操作过程中,最重要的是要保持工作区的无菌、清洁。
30、因此,在操作前20~30分钟要先启动超净台和紫外灯,并认真洗手和消毒。
31、在操作时,严禁喧哗,严禁用手直接拿无菌物品,如瓶塞等,而必须用消毒的止血钳、镊子等。
32、培养瓶应在超净台内操作,并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。
33、对于吸管应先用手拿后1/3处,戴上胶皮乳头,并用酒精灯烧烤之后再吸液体。
34、4、常用清洁液的配制法⑴重铬酸钾清洁液:可根据不同需要,选用下列的任何一种浓度。
35、先将重铬酸钾溶于水中,再慢慢加入浓硫酸。
36、注意,此时可产生高热,应防止容器破裂。
37、重铬酸钾清洁液除污力强,腐蚀性大,应避免接触皮肤和衣服。
38、为防止吸收空气的水分而变质,此液应贮存于带盖的容器中。
39、如清洁效力较差,可再加入少量重铬酸钾及浓硫酸,还可继续使用。
40、直到液体变蓝绿色,即不能再用。
41、配制重铬酸钾清洁液时,宜用耐高温的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑料容器。
42、使用玻璃器皿时,应特别注意防止产生高热而破裂,切忌用量筒来配制。
43、⑵磷酸三钠将其配成5%~10%水溶液,可用于洗涤玻璃器皿上的油污,但经常使用腐蚀玻璃,使器皿表面模糊、毛糙。
44、⑶硝酸清洁液将其配成50%水溶液,可用于清洁微量滴定筒。
45、⑷乙二胺四乙酸二钠(EDTA钠盐)将其配成5%~10%水溶液,可洗脱粘附于玻璃器皿内壁的白色沉淀物。
46、⑸尿素溶液尿素是溶解蛋白质的良好溶剂,适用于洗涤粘附有血液血清等蛋白质的吸管、试管等。
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